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液相色谱柱的装柱方法
   液相色谱柱的一些要求
  zui常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶。反相色谱系统使用非极性填充剂,以十八烷基硅烷键合硅胶zui为常用,辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶(如氰基键合硅烷和氨基键合硅烷等)也有使用。正相色谱系统使用极性填充剂,常用的填充剂有硅胶等。离子交换色谱系统使用离子交换填充剂;分子排阻色谱系统使用凝胶或高分子多孔微球等填充剂;对映异构体的分离通常使用手性填充剂。
  填充剂的性能(如载体的形状、粒径、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、含碳量和键合类型等)以及色谱柱的填充,直接影响供试品的保留行为和分离效果。孔径在15nm(1nm=10Å)以下的填料适合于分析分子量小于2000 的化合物,分子量大于2000 的化合物则应选择孔径在30nm 以上的填料。除另有规定外,分析柱的填充剂粒径一般在3μm~10μm 之间。粒径更小(约2μm)的填充剂常用于填装微径柱(内径约2mm),使用微径柱时,输液泵的性能、进样体积、检测池体积和系统的死体积等必须与之匹配;如有必要,色谱条件也需作适当的调整。当对其测定结果产生争议时,应以品种正文规定的色谱条件的测定结果为准。 存放前除去杂质和盐,采用合适的存放溶剂,避免色谱柱床的干枯,避免机械振动,防止细菌生长,注意存放的温度。
  液相色谱柱的装柱方法
  1. 色谱柱应该是可以直接接在匀浆罐上的,如果不能,则需要一个转换接头。这个转换接头的尺寸很重要,既要能防止漏液,又要避免过硬或尺寸不合适而导致色谱柱接口螺纹的损坏;
  2. 具体装柱过程一般来说是①先以合适的匀浆液(多为有机溶剂,刘国诠老师的《色谱柱技术》一书中列的比较全,可供参考)将填料充分分散(可以借助搅拌、超声等方式);②在填料匀浆的过程中,完成准备工作,即把色谱柱接在匀浆罐的下端(色谱柱不接匀浆罐的一段要接好筛板和柱头,确保拧紧但不能拧死以免损坏色谱柱),打开匀浆罐上端和气泵之间的接头以便灌入匀浆液;③匀浆液罐好后,接好匀浆罐上端接头,开始加压;④选择合适的压力,就可以把填料压实了;⑤稳定在适当的压力上压一定时间后,卸掉压力,卸下色谱柱,把接匀浆罐这一段的填料抹平,装上筛板和柱头即可使用。
  3. 装柱是个困难的过程,需要耐心摸索压力、匀浆液体积等参数,才能确保柱床均匀密实,达到*柱效和峰形。如果装的不好,则可能出现柱效不够,或拖尾等问题。
         液相色谱柱的装柱方法一般情况下都是这样操作的,特殊情况请厂家或者代理商。