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进来轻松学会使用Dionex耗材
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更新时间:2019-10-08
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进来轻松学会使用Dionex耗材
制备的样品在样品瓶中混合不均匀或每次取样时注射器对样品产生玷污以及样品挥发等都会影响出峰灵敏度的重复性。定量不重复由上述三种原因引起的可能性很大,而且都和进样操作密切相关,因此可一起进行检查。只有在上述检查后无异常发现时才转入接下的Dionex耗材使用步骤。
Dionex耗材操作过程中需要注意的知识点:
1、避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使Dionex耗材从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。
2、应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。
3、一般说来Dionex耗材不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。
4、选择使用适宜的流动相,以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱,Dionex耗材是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入Dionex耗材之前预先被硅胶“饱和”,避免Dionex耗材中的硅胶基质被溶解。
5、避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和Dionex耗材之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。
6、经常用强溶剂冲洗Dionex耗材,清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50-75ml。