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论如何处理Waters色谱耗材的污染问题
   论如何处理Waters色谱耗材的污染问题
  Waters色谱耗材的柱效是Waters色谱耗材在色谱分离过程中主要由热力学因素所决定的分离效能。通常用理论塔板数表示。柱效是衡量Waters色谱耗材性能的一项主要指标,柱效越高,分离能力越强。
  柱效测试方法可以根据每根Waters色谱耗材附带的测试报告提供的方法条件进行试验。通常实际测试结果比Waters色谱耗材所附的测试报告结果偏低是正常的。因为仪器公司测试塔板数的HPLC系统是专门设计的,整个系统扩散体积非常小。
  如果新柱测试结果与报告中有很大不同,很大可能是由于色谱系统配置以及死体积等因素的影响。需要考虑不同柱外体积的影响:
  柱外体积是指“额外”或“外部”(相对于Waters色谱耗材)体积,是系统的一部分,尤其是各LC部件、Waters色谱耗材之间的连接管线体积、进样体积和流通池体积。
  对于各部件的连接管线,为了减少体积可以使用更小内径的管线。
  下面的例子就显示了柱外体积的影响。当使用较小的柱子时,10ml的柱外体积可以得到良好的分离结果,当加上一段管线形成50mL的柱外体积,色谱峰变宽、分离度降低。在向系统中添加体积不明的管线时,这种情况经常发生。添加一段太长的管线,或内径较大的短管时,会使柱效Waters色谱耗材的分离度变差。
  不同内径的管线对色谱峰展宽的影响。管线内径越大,样品谱带在管线内发生的扩散也就越da,色谱峰展宽也就越严重。当然,内径越大,同等长度的管线带进去的柱外体积也越大。
  原则上,系统的大柱外体积(管线体积、进样体积和检测器体积)不应超过柱体积的10%。
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